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原种的灭菌炉制备

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原种的灭菌炉制备

发布日期:2017-12-06 00:00 来源:http://www.syjjxzz.com 点击:

母种接种到原种培养基上,灭菌炉进行扩大繁殖育种即为原种,原种一般采用广口瓶或袋装。

1.培养基配方

配方一 木屑麸皮培养基

阔树木78%、麸皮20%、糖1%、石膏粉1%、水65%、PH值自然

配方二 棉籽壳木屑混合培养基

棉籽壳90%、糖1%、麸皮5%、过磷酸钙3%、石膏粉1%、PH值自然

灭菌炉

2.拌料与装袋

选用新鲜无霉变原料,根据生产所需的数量,计算配料总量,将麸皮、石膏粉均匀的混合在培养料里,糖和过磷酸钙溶于水解后,按上述干料量加入水,比例为1:1、3拌匀,培养料含水量60%为宜,含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。堆闷30分钟后,装瓶(袋)。用机械或人工装袋稍加压实。塑料袋规格通常为袋宽9厘米,长21厘米,单层厚0.04厘米,在袋口外套入塑料环,形成象瓶子一样,然后在袋口内塞松紧适宜棉塞、或用牛皮纸包扎好。

原种灭菌方法有两种,高压灭菌和常压灭菌。高压灭菌又称加压蒸气灭菌,灭菌原理:在高温(120℃)、高压(1公斤/厘米2)条件下灭菌2-3小时,将芽孢在内的微生物全部杀死。常压灭菌称流通蒸气灭菌,由于灭菌设备、条件和基本因素的不同,温度变动在90-103℃之间,其热力、穿透力不强,在一定温度下维持足够时间达到灭菌目的,通常在100℃下维持8-10小时。

4.接种与培养

不论用接种箱或接种室接种,在接种前,需对接种箱或接种室用0.2%的来苏水或漂白粉进行消毒处理,然后将灭菌过的料瓶(袋)放入接种箱内或接种室内,用紫外线灯照射30分钟后,在无菌条件下进行接种,或在接种前用烟雾剂密闭薰蒸消毒。即烟雾剂点燃消毒时应关闭门窗。接种室消毒,一间房需点燃3盒50克规格烟雾剂;接种箱消毒每次仅用重量为40克,但又细分为20包的其中2包点燃即可(每包2克)。一般18×180厘米,母种试管每支可接4—6瓶(袋)原种。将接种后的菌种瓶(袋)放入发菌室培养。以培养室温度22-26℃,相对湿度为80%以下,光线为弱散射光,发菌期间应保持良好的通风条件。原种从接种到菌丝长满瓶(袋)需30—40天。


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